LB Agar (Miller) é um meio nutritivo rico projetado para o crescimento de culturas puras de linhagens recombinantes, com base na formulação descrita por Miller. E. coli é cultivada até a fase de log tardio em meio LB. Alguns vetores de plasmídeos replicam em alta quantidade e não requerem amplificação seletiva. No entanto, alguns vetores não replicam tão livremente e precisam ser amplificados seletivamente. A cloranfenicol pode ser adicionada para inibir a síntese do hospedeiro e prevenir a replicação do cromossomo bacteriano.
LB Agar, Miller contém 10 g/L de cloreto de sódio, diferente dos níveis nas formulações Lennox. Isso permite que o pesquisador selecione a concentração ótima de sal para uma linhagem específica. O meio pode ser suplementado assepticamente com glicose ou antibióticos.
Especificações:
- Marca: Neogen® Culture Media
- Tipo de amostra: Não seletivo
- Plataforma: Meio de cultura desidratado
Fórmula:
- Triptona: 10,0 g/L
- Extrato de levedura: 5,0 g/L
- Cloreto de sódio: 10,0 g/L
- Agar: 15,0 g/L
Preparação:
- Dissolva 40 gramas do meio em um litro de água purificada.
- Aqueça com agitação frequente e ferva por um minuto para dissolver completamente o meio.
- Autoclave a 121°C por 15 minutos.
- Resfrie para 45-50°C e adicione assepticamente o antibiótico esterilizado por filtração, se necessário.
Número do item anterior: O produto era anteriormente conhecido como Acumedia Product: 7213 LB Agar (Miller) e LabM Product: LAB168 LB Agar (Miller).